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硕士开题报告 |
１．论文选题的目的和意义：
1.1 课题名称
眼针对高血脂症大鼠载脂蛋白的影响
1.2 本选题有关的研究方向的历史、现状和发展情况分析
高脂血症被认为是心脑血管疾病中独立的危险因素。其临床意义已经被大量的临床流行病学调查和实验证实。因此，防治高脂血症已成为防治心脑血管疾病的重要环节。
目前，西药治疗高脂血症虽有肯定疗效，但均有停药反跳等副作用。因此，发挥传统医学的降脂作用已成为国内外研究的热点。在中药降脂的研究中已经取得了一定进展，主要是从抑制内源性胆固醇的合成及外源性胆固醇的吸收、清除修饰LDL-c、影响载脂蛋白、抗氧化等方面进行研究，筛选出了许多有效的降脂中药。但是，以针灸为主进行降脂研究的报道尚不多见。范氏[1]、李氏[2]、陈氏[3]等分别对Ⅱ型糖尿病患者、中风患者和动脉硬化患者进行针刺降脂研究，临床观察主要采用了胆固醇、甘油三脂、载脂蛋白等生化指标，证实针刺对高脂血症有确切的治疗作用。吴氏等
[4,5]也证实艾灸后血清载脂蛋白变化有显著意义。张氏等［６、７］通过电针心经腧穴对大鼠高血脂症进行了多项研究，以三磷酸腺苷酶、琥珀酸脱氢酶、血浆内皮素、降钙素基因相关肽等为观察指标，为针刺降脂作用提供了实验依据。
1.3 前人在本选题研究领域中的工作成果简述
眼针是彭静山先生创立的针灸疗法，后经眼针传人田维柱教授等医家不断深入研究而名扬海内外，眼针具有疗效显著、简单易行等特点，适应症可达几十种［８］，主要集中在神经内科、循环内科、软伤科等。近年来眼针的实验研究逐渐增多［９～１１］，但有关眼针治疗高脂血症的实验研究未见报道。笔者拟通过观察眼针对高血脂症大鼠载脂蛋白的影响，进一步探讨眼针在防治高脂血症中的作用。
1.4 本选题研究的主要内容和重点
本选题研究的主要内容如下，首先将大鼠随机分为正常对照组、高脂对照组、眼针治疗组、西药治疗组。除正常对照组外，其余三组建立高脂血症大鼠模型。之后对两个治疗组分别给予眼针和西药治疗。最终抽取全部大鼠血清标本，检测载脂蛋白，进行统计学处理，总结眼针治疗高脂血症的疗效。
本选题研究的重点在于以下两个方面，第一，选取对高脂血症具有治疗作用的眼针穴位。中医理论认为［１２～１５］，高脂血症乃脏腑功失司，膏脂生成、输化失常所致，病理性质主要表现为脾肾阳气亏损，蒸腾气化无力，膏脂不得布散，反渗入血而成。或肝肾阴血不足，虚火灼津为痰，痰阻血凝，最终为患。其病变脏腑主要涉及肝、肾、脾三脏，病位在中焦和下焦。据此，选取眼针的中焦区和下焦区为治疗穴位。又根据肝脏为脂质代谢中心的现代医学理论，同时也选取眼针的肝区为治疗穴位。
第二，选择具有前瞻性的观察指标。目前文献报道的实验研究多采用酶法测定血清中总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇［１６，１７］。也有测定肝脏中脂质含量的实验研究［１８］。也有取肝脏作病理学检查，观察肝脂肪变情况的报道［１９］。国内外近十年研究表明，在具体判别心脑血管疾病危险因素时，载脂蛋白水平比总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇的水平更为重要［２０～２２］。这是因为血脂是与蛋白质结合的形式存在于血液中的，而ApoA/ApoB的比例是来自于直接测定HDL和LDL中相应的标记蛋白，其敏感性和特异性极强，具有较强的科研价值。所以，笔者拟采用载脂蛋白（ApoA.ApoB)为实验观察指标。
２．研究方案：
2.1 技术方案
2.1.1 动物及分组
Wistar大鼠４０只，体重(150±5)g，雌雄各半，按性别，体重先分层，后随机分为4组，即正常对照组、高脂对照组、眼针治疗组和西药治疗组，各组均为10只。
2.1.2 实验时程及治疗时程
实验全程６５天。首先以基础饲料饲养５天，观察证实健康后称重。其中正常对照组始终给基础饲料，基础饲料配方：玉米粉 36.5%，面粉35%，麦麸15%，豆粉10%，鱼肝油1%，骨粉1%，酵母粉1%，盐0.5%。其余3组从第６天开始给高脂饲料３０天，高脂饲料配方：基础饲料87%，胆固醇2%，猪油10%，牛胆酸钠1
%，甲基硫氧嘧啶0.2%［２３］。之后３０天改为基础饲料。上述各组动物均自由摄食饮水，连续喂养。
眼针治疗组从停服高脂饲料之日起，开始针刺大鼠双侧的上焦区、中焦区和肝区，以34＃0.5寸不锈钢毫针由右至左迅速针刺，留针15 min，每日一次，共计３０天。西药治疗组从停服高脂饲料之日起，称重，将非诺贝特片0.04g/kg.d(相当于临床用量的10倍量)灌胃给药３０天。末次治疗后禁食12
小时(不禁水)，称重。用乙醚轻度麻醉，内眦取血2 ml，分离血清，分别测定载脂蛋白。
2.1.3 样本处理及指标检测方法
全部大鼠均抽取血样，分离血清，用自动生化分析仪，按临床常规检测载脂蛋白。
2.1.4 统计学方法：
用SPSS for Windows(11.0)统计软件进行数据分析，数据以±s表示，两组间比较用t检验，多组间比较用F检验，两两比较用q检验，直线偏相关系数用F检验(P<0.05)。
2.2 实施方案所需的条件
动物室，实验室，自动生化分析仪，统计软件
2.3 技术关键和存在的主要问题
高脂血症大鼠模型的建立是本选题的技术关键之一。近年国内文献报道多采用喂食或灌胃高脂饲料造模。高脂饲料多以胆固醇胆酸、甲基硫氧嘧啶、胆酸及动物脂肪按一定比例配制而成［２４，２５］。笔者拟参考佟氏［２３］方法造模，此法经济实用、可操作性较强。
如何定位大鼠的上焦区、中焦区和肝区也是本选题的技术关键。参考人体眼针八区的划分法［２６］以瞳孔为中心，按钟表的比拟进行定位，穴的位置均距眼眶2毫米。针刺时采用沿皮横刺法，在选好的经区内，由右至左沿皮刺入真皮达到皮下组织中。
如何判断得气是本选题存在的一个主要问题。眼针快速刺入以后，不用提插、捻转、开合等任何手法。以病人感觉有麻酸胀痛或温热、清凉等感觉直达病所，为得气现象。如未得气，可以把针提出1/3改换一个方向再刺入，或用手刮针柄，或用双刺法，促进得气。而大鼠的得气表现有待于进一步探讨。
2.4 预期能达到的目标
通过本选题证实眼针具有治疗高脂血症的作用，扩大眼针的适应症。
３．研究计划进度表
2002年4月～2002年5月为实验准备阶段。购买实验器材，联系相关部门。
2002年5月～2002年7月为实验进行阶段。按预定实验步骤，得出实验数据。
2002年7月～2002年8月为实验总结阶段。分析实验数据，做出实验结论。
2002年8月～2003年4月为完成论文阶段。根据实验内容，撰写课题论文。
４．经费主要项目预算
实验用品费用：1000元
动物室费用：500元
实验室费用：500元
化验费用：1000元
5．主要参考文献目录。
１ 范冠杰．针药合用对非胰岛素依赖型糖尿病患者血脂影响的临床研究．中国针灸,1998； 18(3):139
２ 李应昆．头电针治疗中风及其对血脂、载脂蛋白影响的研究．四川中医 ,1997 ;(7) ：367
3 陈邦国．针刺对青壮年脑动脉硬化患者血脂的影响．中国针灸，1998；18(6) ：331
4 吴中朝．艾灸对老年人血液载脂蛋白研究．中国针灸，1998 ；18(5)：261
５ 吴中朝．艾灸抗高甘油三脂血症脂质过氧化正交试验临床研究.中国针灸,1998;18(6)：325
６ 张露芬．电针心经腧穴对大鼠高血脂症心肌琥珀酸脱氢酶、三磷酸腺苷酶活性及心肌组织结构的影响．针刺研究， 2000 ；(3)：234
７ 张露芬．电针心经腧穴对大鼠高血脂症血浆内皮素、降钙素基因相关肽影响的实验观察 ．中国中医基础医学杂志 ，2001 ；(5)：439
８ 眼针疗法的研究进展。北京中医药大学学报 ， 1997 ；（２）：97
９ 黄晓洁．眼针疗法对急性脑缺血家兔再灌注的影响．辽宁中医杂志，2000；（10）：648
１０ 田维柱．眼针对高血压左心功能影响180例观察．中医药学刊，2001；(1)：34
１１ 张明波．眼针疗法对缺血性中风血液流变学影响的研究.辽宁中医杂志,1997;24(5)：435
１２ 宋剑南．高脂血症与中医痰浊关系的实验研究.中国中医基础医学杂志,1995;1(1)：49
１３ 吴松鹰，林求诚，杨持．老年脂质代谢紊乱中医易患因素的临床调查．中国中西医结合杂志，1993；13(5)：273
１４ 骆丰．邵念方病症结合经验．辽宁中医杂志，1997；24(1)：12
１５ 张继东．陈克忠治疗高脂血症的经验．山东中医杂志，1995；14(3)：123
１６ 张克平．大剂量谷维素对高血脂症大鼠的治疗作用．苏州医学院学报， 2000；20(7)：863
１７ 何素琴．猕猴桃果汁降血脂作用的动物试验．川北医学院学报 ，1999；14(3)：270
１８ 张吉正，范英昌，张伯礼，等．脂肝清对高胆固醇血症家兔模型脂质代谢影响的实验研究． 天津中医，2000；18(6)：29
１９ 张雪琳．10例冠心病患者血脂及载脂蛋白aPoA_1和aPoB的检测分析．右江民族医学院学报， 2000 ；(1)：46
２０ 俞蔚．脂蛋白、载脂蛋白与冠心病相关性探讨．浙江中西医结合杂志，2000 ;(1)：16
２１ 陆紫敏．载脂蛋白B对急性脑梗塞患者的影响 ． 临床内科杂志，2000 ；(1)：30
２２ 李清，赵莲华．血脂及载脂蛋白A_1、B_(100)与冠心病 ．河北医学 ， 2000 (1)：8
２3 佟继铭，刘玉玲．黄芩茎叶总黄酮调血脂作用研究．中草药 ，2000；31(3)：75
２４ 刘 明．一种简便实用的大鼠高脂血症模型．中国药理学通报，1989；5(2)：119
２５ 徐叔云，卞如濂，陈修．降血脂药及抗动脉粥样硬化药的筛选.药理实验方法学．北京：人民卫生出版社，1985；781～783
２６ 彭静山．眼针疗法．沈阳：辽宁科技出版社 1990
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